用于生产L—苯丙氨酸的基因工程菌的构建

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本文报道用含tyrB基因(在大肠杆菌中编码芳香族氨基酸转氨酶)的质粒pKB7转化不同的宿主菌,筛选出CTB2菌(pKB7转化JM107得到)表达的芳香族氨基酸转氨酶活力最高。进一步研究证明CTB2菌在菌浓度为20mg/ml,温度为30℃,反应60分钟,能催化苯丙酮酸加氨生成大量的L-苯丙氨酸,而没有付产物酪氨酸生成。以从CTB2菌中提取纯化出的质粒为模板,经PCR扩增反应可以得到约长1.2kb的tyrB基因片段,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表明CTB2菌可溶性蛋白在分子量约40000,有一条明显加深的蛋
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