【摘 要】
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目的 探讨microRNA-26a(miR-26a)对Krueppel样因子9(KLF9)的表达和胶质瘤侵袭能力的影响.方法 运用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测136例脑胶质瘤组织及65例癌周组织的miR-26a和KLF9表达水平.体外培养SNB19胶质瘤细胞,并分别转染miR-26a mimics和si-KLF9后,命名为miR-26a mimics组和miR-26a-si-KLF9组,另设未处理细胞为对照组.采用qRT-PCR和Western blot检测miR-26a
【机 构】
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陆军军医大学第一附属医院神经内科,重庆 400038;陆军军医大学第一附属医院神经外科
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目的 探讨microRNA-26a(miR-26a)对Krueppel样因子9(KLF9)的表达和胶质瘤侵袭能力的影响.方法 运用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测136例脑胶质瘤组织及65例癌周组织的miR-26a和KLF9表达水平.体外培养SNB19胶质瘤细胞,并分别转染miR-26a mimics和si-KLF9后,命名为miR-26a mimics组和miR-26a-si-KLF9组,另设未处理细胞为对照组.采用qRT-PCR和Western blot检测miR-26a mimics组和对照组中miR-26a和KLF9蛋白的表达水平,并通过荧光素酶试验验证miR-26a与KLF9基因之间的直接调控关系.利用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力.结果 与癌周组织相比,qRT-PCR和Western blot结果表明,miR-26a mRNA相对表达量和KLF9蛋白表达水平在Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤中明显降低(P<0.05).qRT-PCR结果表明,与对照组相比,miR-26a mimics组SNB19细胞中miR-26a和KLF9 mRNA表达量显著增加(P<0.05);Western blot结果显示,miR-26a mimics组KLF9蛋白表达水平显著增加(P<0.05);双荧光素酶实验结果表明,miR-26a显著增强KLF9的转录活性.Transwell结果表明,与对照组相比,miR-26a mimics组与miR-26a-si-KLF9组细胞侵袭能力显著降低(P<0.01);与miR-26a mimics组相比,miR-26a-si-KLF9组细胞侵袭能力明显增强(P<0.05).结论 miR-26 a可能通过靶向促进KLF9基因的蛋白表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭能力.
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