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目的曲妥珠单抗是乳腺癌临床治疗指南对于HER2阳性患者的推荐靶向药物,但临床应用发现大多数HER2高表达的乳腺癌患者对曲妥珠单抗不产生反应,因此阐明其耐药机制是临床治疗的迫切需求。Beclin1是调控细胞自噬过程的关键分子,最新研究提示其与多种肿瘤细胞的治疗抵抗密切相关。本研究将观察Beclin1是否影响HER2阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的敏感性。材料和方法利用慢病毒介导的方法分别在曲妥珠单抗敏感的HER2阳性乳腺癌BT474和耐药的HCC1954细胞敲低Beclin1,通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测Beclin1 mRNA和蛋白的表达;通过CCK-8法和克隆形成实验检测抑制Beclin1后曲妥珠单抗对乳腺癌细胞的体外杀伤作用,流式细胞术检测抑制Beclin1后对于曲妥珠单抗抑制细胞周期进程的影响,裸鼠成瘤实验观察敲低Beclin1对于曲妥珠单抗抑制乳腺癌细胞体内生长的影响,通过Western blotting检测敲低Beclin1对于MAPK和PI3K/AKT信号通路的影响;通过检索基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO),分析乳腺癌组织中Beclin1的表达水平与曲妥珠单抗治疗效果的关系。结果在稳定敲低Beclin1的HER2阳性乳腺癌BT474和HCC1954细胞中,Beclin1mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组细胞(P<0.05);与对照组细胞相比,敲低Beclin1增强曲妥珠单抗对敏感的BT474细胞和耐药HCC1954细胞体外增殖和克隆形成能力的抑制(P<0.05)、增强曲妥珠单抗对BT474细胞和HCC1954细胞周期进程的抑制(P<0.05)、增强曲妥珠单抗对BT474细胞和HCC1954细胞裸鼠体内生长的抑制(P<0.05);敲低Beclin1增强曲妥珠单抗对MAPK和PI3K/AKT信号通路的抑制;GEO数据库分析结果显示Beclin1低表达的患者可以从曲妥珠单抗治疗中获益(P<0.05),而高表达的患者不能。结论抑制Beclin1可以通过促进细胞周期阻滞增加HER2阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的敏感性,并且Beclin1可能成为新的预测曲妥珠单抗疗效的生物标志物。