【摘 要】
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用CTAB法提取怀地黄嫩叶DNA，进行简单重复问序列标记(ISSR)分析。通过单因子实验分别研究了退火温度、Taq酶单位、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应
【机 构】
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西北大学生命科学学院,华美生物工程公司博士后工作站
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用CTAB法提取怀地黄嫩叶DNA，进行简单重复问序列标记(ISSR)分析。通过单因子实验分别研究了退火温度、Taq酶单位、Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响，找出各自的合适条件，而且每一个合适条件确定以后都被作为后续研究的一个条件。通过各个因子的组合研究建立了适宜于怀地黄ISSR分析的扩增体系：25μL PCR反应体积，1×Taq DNA酶缓冲液(10mmol／L Tris-HCl，50mmol／L KCl，0．1％Trion X-100，pH9．0
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