DEK真核表达载体的构建及其对p53启动子活性的影响

• 作 者: 刘婕 闫志风 张亚楠 林娅红 丁丽华 叶棋浓
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,解放军总医院妇产科
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2013年1期
• 关键词: DEK 萤光素酶报告基因 p53启动子 DEK luciferase reporter gene p53 promoter
• 基金项目: 国家自然科学基金（31071174）

目的：构建DEK的pcDNA3-Flag表达载体，研究其对抑癌基因p53启动子活性的影响。方法：以乳腺文库为模板，PCR扩增DEK编码序列，克隆到pcDNA3-Flag载体，构建成pcDNA3-Flag-DEK，转染293T细胞，Western印迹鉴定peDNA3-Flag载体介导的DEK的表达，萤光素酶报告基因活性实验研究DEK对p53启动子活性的影响。结果：双酶切实验证实得到pcDNA3-Flag-DEK阳性克隆；Western印迹实验发现DEK在293T细胞内表达；转录活性实验表明在ZR75-1乳腺