含结核分枝杆菌Ag85A基因的2型重组腺相关病毒的构建和免疫原性

• 作 者: 孙海峰 俞守义 欧程山 胡贵方
• 机 构: 南方医科大学流行病系,南方医科大学放射医学系
• 出 处: 热带医学杂志
• 发表日期: 2007年3期
• 关键词: 结核分枝杆菌 AG85A 重组腺相关病毒 2型 基因表达 细胞毒性T淋巴细胞活性 Mycobacterium tuberculosis Ag85A rec
• 基金项目: 广东省医学科研基金（No.2005379）.

目的构建含结核分枝杆菌Ag85A基因的2型重组腺相关病毒并初步研究其免疫原性。方法采用PCR法从结核杆菌H37Rv株扩增Ag85A基因，将PCR扩增产物克隆于2型腺相关病毒（AAV-2）表达质粒pSNAV中，构建重组质粒pSNAV-Ag85A；用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中，G418筛选得到能表达目的基因混合细胞系BHK—Ag85A；用具有rAAV-2包装功能的辅助病毒感染BHK-Ag85A，纯化后得到rAAV-2-Ag85A：Western blotting检测重组病毒Ag85A基因