【摘 要】
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目的本实验旨在研究和探讨柴胡皂苷D（SSD）诱发人肝癌细胞凋亡和自噬的作用以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测SSD对肝癌细胞增殖活性的抑制作用;采用GFP荧光
【基金项目】
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贵州省中医药管理局课题项目资助(QZYY2011)
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目的本实验旨在研究和探讨柴胡皂苷D（SSD）诱发人肝癌细胞凋亡和自噬的作用以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测SSD对肝癌细胞增殖活性的抑制作用;采用GFP荧光法检测肝癌细胞自噬体的形成;采用流式细胞术检测SSD对肝癌细胞凋亡的影响;采用Western blot的方法检测SSD对肝癌细胞中LC3Ⅱ、Beclin 1、p-S6K1蛋白表达的影响。结果人肝癌细胞PLC、MHCC-97H、SMMC-7721以及Huh7经SSD干预48 h后,增殖活性明显受到抑制,且具有剂量依赖性。IC50分别为51. 48,46. 19,39. 87和48. 95μmol·L-1。经SSD处理后,肝癌细胞出现自噬体的数量明显多于未处理的细胞（P <0. 05）。经SSD+3-MA和SSD+z-DEVD-fmk处理后,肝癌细胞死亡率明显低于仅用SSD处理的细胞死亡率（P <0. 05）。经SSD作用后,肝癌细胞LC3Ⅱ和Beclin 1的表达量较未作处理的细胞明显上调,而p-S6K1蛋白表达量明显降低（P <0. 05）。结论 SSD可以通过负调控mTORC信号传导通路诱发肝癌细胞自噬性死亡,从而发挥抗肿瘤活性。
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