论文部分内容阅读
目的 探讨高糖对大鼠肾小球内皮细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响及机制.方法 5 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖(加或不加卡托普利、糜蛋白酶抑制剂)分别作用于细胞12、24、48、72 h后,用ELISA法检测上清与细胞内的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平；实时荧光定量PCR法检测血管紧张素原、肾素mRNA的表达；Western印迹法检测细胞AngⅡ1型受体( AT1R)、AngⅡ2型受体(AT2R)、血管紧张素原及肾素的表达；激光共聚焦间接免疫荧光法检测AT1R、AT2R、肾素在细胞内的分布及改变.结果 与对照组相比,高糖刺激细胞12、72 h时,上清AngⅡ水平均升高(P＜0.05)；而在细胞内AngⅡ水平只在72 h时有升高(P＜0.05)；在高糖刺激24、48 h时,细胞内外AngⅡ水平均未发生明显变化.加入卡托普利、糜蛋白酶抑制剂预处理,然后高糖刺激细胞72 h,上清和胞内AngⅡ水平较不加抑制剂时显著下降(P＜0.05).高糖可使血管紧张素原mRNA表达上调、肾素mRNA表达下调(均P＜0.05).同时,高糖可使血管紧张素原蛋白表达上调、AT1R蛋白表达下调,而AT2R、肾素蛋白表达量无明显变化,但激光共聚焦间接免疫荧光观察到AT2R发生由细胞核到细胞质的转移.结论 高糖可激活大鼠肾小球内皮细胞内的RAS,这种作用至少与血管紧张素转换酶(ACE)和非ACE途径有关.高糖可通过增加底物水平引起肾小球内皮细胞AngⅡ的改变,同时AngⅡ受体在高糖刺激下也发生相应的改变。