人血管紧张素转换酶2基因的克隆及其真核表达载体的构建

• 作 者: 肖洪广 高俊 刘利东 林勇平 黄泽红 李宁
• 机 构: 广州医学院医学检验系
• 出 处: 热带医学杂志
• 发表日期: 2006年7期
• 关键词: SARS冠状病毒 血管紧张素转换酶2 真核表达 SARS-CoV ACE2 eukaryotic expression
• 基金项目: 广州市科技局应用基础项目（No.2004J1-C0211）,广州市教委科研项目（No.1040.1047）,广州医学院科研项目（No.03-K-25）.

目的克隆人血管紧张素转换酶2基因（ACE2），并构建其真核表达载体。方法用Trizol试剂从人肺组织提取总RNA，然后经逆转录得到人ACE2的cDNA。半巢式PCR方法扩增人ACE2基因后，先进行T—A连接，转化感受态大肠杆菌DH5α，接种含IPTG和x—Gal平板筛选重组子，并进一步亚克隆至真核表达质粒载体pcDNA3．1（＋）。经PCR扩增、酶切和序列测定方法鉴定重组质粒。结果获得了人ACE2的编码基因，并成功构建了其真核表达载体。结论人血管紧张素转换酶2是SARS冠状病毒的功能受体，与SARS冠状病