绞股蓝皂苷对原代培养胚鼠中脑多巴胺能神经细胞的保护作用

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目的 探讨绞股蓝皂苷(GPs)对原代培养的胚鼠中脑多巴胺(DA)能神经细胞的保护作用. 方法原代培养胎鼠中脑腹侧神经细胞,分别应用100、200、400、800μg/mL GPs作用6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,同时设空白对照组和阳性对照(NGF)组,应用MTT比色试验检测GPs对细胞活性的影响,筛选GPs的最佳作用浓度和时间.免疫细胞化学染色检测抗酪氨酸羟化酶(TH)的表达;应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导细胞损伤,同时设空白对照组和GPs预处理组,应用免疫细胞化学染色和流式细胞仪分别检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞凋亡.结果 MTT检测结果显示400μg/mL GPs作用48h后细胞活性最高,与NGF组比较差异无统计学意义(P>0.05).TH免疫染色显示400μg/mL GPs组和NGF组TH阳性细胞数均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);iNOS免疫染色和流式细胞仪检测显示400 μg/mL GPs预处理组iNOS阳性细胞数和细胞凋亡率高于空白对照组,但仍低于MPTP组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 400μg/mL GPs作用48 h对MPTP诱导的DA能神经细胞的损伤具有保护作用。

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