【摘 要】
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目的 检测柯萨奇病毒B3( CVB3)对大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白(OPN)及Ⅰ型胶原表达的影响,探讨OPN在病毒性心肌炎的可能发病机制.方法 用重复感染率(MOI)为0.5 PFU/cell的CVB3
【机 构】
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山西省运城市中心医院儿科,山西省运城市中心医院普外科
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目的 检测柯萨奇病毒B3( CVB3)对大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白(OPN)及Ⅰ型胶原表达的影响,探讨OPN在病毒性心肌炎的可能发病机制.方法 用重复感染率(MOI)为0.5 PFU/cell的CVB3感染体外培养的大鼠心肌成纤维细胞,细胞分对照组(12 h)、病毒组(感染后12 h、ld、2d及3 d).用RT-PCR及Western Blot、免疫组化检测OPN及Ⅰ型胶原表达,并将OPN表达与Ⅰ型胶原表达进行直线相关分析.结果 (1)RT-PCR测得对照组12h、病毒组12 h、1d、2d及3d5组OPN/β-actin吸光度比值分别为:0.38±0.06、0.56±0.06、0.72 ±0.05、0.98 ±0.06、0.86 ±0.02；Western Blot测得上述5组的OPN/β-actin灰度值分别为:0.26±0.03、0.36±0.03、0.52±0.04、0.76±0.05、0.62±0.02;感染后12 h,OPN表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,OPN/β-actin吸光度比值、灰度值比较差异均有统计学意义(F值分别为74.965、53.004,P均＜0.05)；(2)RT-PCR测得心肌成纤维细胞对照组12 h、病毒组12h、1d、2d、3dⅠ型胶原/β-actin吸光度比值分别为:1.12±0.03、1.18±0.01、1.22±0.02、1.33±0.02、1.28±0.03,感染后12h Ⅰ型胶原表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,差异有统计学意义(F=38.241,P＜0.05)；(3)OPN表达与Ⅰ型胶原有正相关关系(r=0.948,P＜0.001).结论 CVB3可诱导心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原及OPN表达,OPN表达与Ⅰ型胶原表达呈正相关,提示OPN可能促进心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原表达,参与病毒性心肌炎心肌纤维化的发病机制.
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