豇豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆

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【摘要】

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利用RT-PCR的方法,从豇豆种子、子叶及成熟叶片中分别提取RNA,反转录后以该基因两端的保守序列为引物进行PCR扩增,PCR产物与pUCm-T载体连接进行克隆,蓝白筛选重组子,经测序,

【作者】

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杨朝辉雷建军曹必好宋明王亚培王进

【机构】

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西南农业大学园艺系

【出处】

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西北植物学报

【发表日期】

：

2002年5期

【关键词】

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抗虫基因反转录测序豇豆胰蛋白酶抑制剂基因克隆 cowpea trypsin inhabitor genereverse transcriptions

【基金项目】

：

重庆市科技攻关项目

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利用RT-PCR的方法,从豇豆种子、子叶及成熟叶片中分别提取RNA,反转录后以该基因两端的保守序列为引物进行PCR扩增,PCR产物与pUCm-T载体连接进行克隆,蓝白筛选重组子,经测序,其核苷酸同源性高达100%,蛋白质同源性达91%.本试验同时对该基因的表达时期差异进行了大致检测,结果是种子的表达量最高,子叶其次,成熟叶中最低.

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