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目的 研究氯硝柳胺对光滑双脐螺氧化磷酸化的影响,探讨氯硝柳胺的杀螺机制。方法 用线粒体提取试剂盒提取光滑双脐螺成螺线粒体,考马斯蓝染色法检测提取线粒体蛋白含量,用线粒体复合体Ⅳ活性检测试剂盒检测提取过程中组织破碎液、丢弃上清和线粒体悬液中复合体Ⅳ活性以评价提取线粒体的纯度。用线粒体复合物活性检测试剂盒提取光滑双脐螺的线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ,每种复合物各分成0.2μg/ml、1.0μg/ml组和二甲基亚砜（DMSO）组,分别加入终浓度为0.2和1.0μg/ml的氯硝柳胺、0.5%DMSO,分别测定不同波长处的吸光度（A值）,计算复合体的活力值。在96孔板中每孔加人蛋白浓度为33μg/ml的线粒体悬液,分别加入终浓度0.2、1.0μg/ml的氯硝柳胺（0.2μg/ml和1.0μg/ml组）或0.5%DMSO （DMSO组）,测定25℃条件下10、20、30 min的A520值,计算线粒体膜通透性转运孔（mPTP）开放度。在96孔板中每孔加入含终浓度为5μg/ml的JC-1染料、蛋白浓度为0.1 mg/ml的线粒体悬液,0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml分别加入终浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml的氯硝柳胺,氰化羰基-3-氯苯腙（CCCP）组加入20μg/ml的CCCP作阳性对照组,DMSO组加入0.5%的DMSO作阴性对照组,在激发光485 nm、发射光590 nm、25℃条件下连续检测荧光强度30min。组间比较采用单因素方差分析方法。结果 提取获得的线粒体总蛋白浓度为（4.24±0.11） mg/ml,组织破碎液、丢弃上清和线粒体悬液中电子传递链复合物Ⅳ活性分别为（14.88±1.80）、（5.60±0.96）、（24.19±3.53） U/mg,3组间差异有统计学意义（F=46.92,P<0.01）。0.2、1.0.μg/ml组与DMSO组的复合物Ⅰ活性分别为（523.98±120.37）、（559.74±238.48）、（796.64±218.79） U/mg;复合物Ⅱ各组活性分别为（3.70±0.36）、（3.54±1.90）、（5.47±2.18） U/mg;复合物Ⅲ各组.活性分别为（6.03±0.79）、（5.01±0.80）、（5.82±0.69） U/mg;复合物汉各组活性分别为（31.20±3.99）、（32.08±3.20）、（30.82±4.21） U/mg;复合体V各组活性分别为（22.38±3.83）、（23.08±6.50）、（25.84±6.86） U/mg。0.2、1.0μg/ml组线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ活性与DMSO组差异均无统计学意义（F=1.658、1.215、1.181、0.1377、0.2982,P> 0.05）。加入氯硝柳胺10 min时,0.2、1.0μg/ml组和DMSO组mPTP开放度分别为（0.040±0.005）、（0.041±0.002）、（0.039±0.036）;加入20 min时分别为（0.069±0.008）、（0.067±0.002）、（0.065±0.015）;加入30 min时分别为（0.090±0.009）、（0.088±0.002）、（0.087±0.012）。加入氯硝柳胺10、20、30 min,0.2、1.0μg/ml组与DMSO组mPTP开放度差异均无统计学意义（F=0.0.25、0.094、0.060,P>0.05）。相对于DMSO组（1.000）,在加入氯硝柳胺15 min时0.6、0.8、1.0μg/ml组的线粒体膜电位分别为(0.874±0.008、（0.843±0.018）、（0.773±0.027）,均低于DMSO组（F=44.29,P<0.05）;加入30 min时,0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/ml组的线粒体膜电位分别为（0.951±0.051）、（0.886±0.022）、（0.766±0.019）、（0.746±0.016）、（0.675±0.021）,除0.2μg/ml组,其余各组均低于DMSO组（F=125.7,P<0.01）。结论 浓度低于1.00μg/ml的氯硝柳胺对光滑双脐螺线粒体电子传递链复合物活性无影响,也未造成线粒体膜通透性转运孔的开放,但是引起光滑双脐螺线粒体膜电位的剧烈下降,影响光滑双脐螺的氧化磷酸化过程。