【摘 要】
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稻瘟病抗性基因Pi36编码卷曲螺旋核苷酸结合位点-富亮氨酸重复序列（CC-NBS-LRR）结构的抗病蛋白。为了深入研究该基因的结构和功能,试验利用双酶切构建了Pi36基因CC结构域的酵母
【机 构】
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华南农业大学资源环境学院,中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室
【基金项目】
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国家转基因生物新品种培育重大专项“建立高通量克隆稻瘟病抗性基因技术体系”（2009ZX08009-023B）, 国家自然科学基金青年项目（30600400）
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稻瘟病抗性基因Pi36编码卷曲螺旋核苷酸结合位点-富亮氨酸重复序列（CC-NBS-LRR）结构的抗病蛋白。为了深入研究该基因的结构和功能,试验利用双酶切构建了Pi36基因CC结构域的酵母表达载体,通过菌落PCR鉴定和测序验证阳性克隆。然后分别收集培养至不同OD值的酵母细胞提取蛋白,利用Western blotting检测目的蛋白的表达情况。结果表明,目的蛋白成功表达,并且在OD值为1.0的酵母细胞中表达量最大。
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