【摘 要】
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目的 研究高糖刺激对体外培养的小鼠足细胞DNA甲基化转移酶(Dnmts)表达的影响及Dnmt1在高糖刺激诱导的小鼠足细胞损伤中的作用. 方法 以体外培养的小鼠永生化足细胞为研究对
【机 构】
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广东省人民医院(广东省医学科学院)肾内科, 广州,510080;
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目的 研究高糖刺激对体外培养的小鼠足细胞DNA甲基化转移酶(Dnmts)表达的影响及Dnmt1在高糖刺激诱导的小鼠足细胞损伤中的作用. 方法 以体外培养的小鼠永生化足细胞为研究对象,分为正常糖对照组、高糖刺激组、甘露醇组及高糖+干预组(DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷,Dnmt1-siRNA),培养48 h,RT-PCR检测其Dnmts mRNA表达;免疫印迹检测Dnmt1、nephrin及podocin蛋白表达;Transwell转板迁移实验观察不同处理后足细胞迁移数目. 结果 与正常糖对照组比较,高糖刺激组足细胞Dt1 mRNA及蛋白表达增加(P＜0.01),Dnmt3a及Dnmt3b mRNA表达未见明显改变.经5-氮杂-2脱氧胞苷或Dnmt1-siRNA处理48 h后,高糖刺激组导致Dnmt1高表达得到抑制,降低的足细胞裂孔膜蛋白podocin、nephrin表达增加(P＜0.01). 结论 高糖上调足细胞Dnmt1蛋白表达,Dnmt1参与体外高糖诱导的小鼠足细胞损伤.
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