PIM1基因对急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡及JAK2/STAT3信号通路的影响

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目的:探讨PIM1基因对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡的影响,以及对JAK2/STAT3通路的调控作用。方法:收集初诊成人AML患者和单纯缺铁性贫血患者的骨髓单个核细胞,荧光定量PCR检测PIM1 m RNA表达。将AML细胞系U937细胞分为:U937组(U937细胞正常培养)、Si-PIM1组(U937细胞转染含PIM1 m RNA的低表达腺病毒载体)、Si-NC组(U937细胞转染不含PIM1 m RNA的低表达腺病毒载体)、Co A1组(U937细胞中加入浓度为20μmol/L的JAK2激活剂Co A1)、Si-PIM1+Co A1组(U937细胞转染含PIM1 m RNA低表达的腺病毒载体并加入浓度为20μmol/L的Co A1)。培养24 h。荧光定量PCR和蛋白印迹法检测U937细胞PIM1 m RNA和蛋白、JAK2/STAT3通路、细胞周期、凋亡相关蛋白表达;噻唑蓝法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果:AML患者骨髓单个核细胞中PIM1 m RNA表达水平高于单纯缺铁性贫血患者(P<0.05)。与U937组相比,Si-PIM1组细胞PIM1 m RNA和蛋白、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、CDK2蛋白、细胞增殖活性、S期比例、G2/M期比例降低(均P<0.05),p27、Caspase-3蛋白、G0/G1期、凋亡率升高(均P<0.05),而Co A1组上述指标的变化情况与Si-PIM1组正好相反,Co A1可逆转Si-PIM1对U937细胞的作用效果。U937组、Si-PIM1+Co A1组、Si-NC组U937细胞上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:敲低PIM1基因表达可抑制U937细胞增殖、促进凋亡,缓解ALM进程,且上述作用可能与抑制JAK2/STAT3通路活化有关。
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