兔原始生殖细胞(PGCs)体外培养和生物学特性

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:MKLIN
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为了探究兔原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)体外培养的生物学特性及胎龄、维甲酸(retinoic acid RA)、福司柯林(forskolin,FK)、4-羟基三苯氧胺(4-hydroxytamoxifen,4OHT)、血清(FBS)和血清替代物(KSR)对PGCs分离培养的影响,本试验从E10.5~E15.5的胎兔生殖嵴中分离PGCs,通过形态学观察、碱性磷酸酶(AKP)染色、RT-PCR等方法对其进行鉴定.在基础培养液中分别添加RA、FK、4OHT、FBS和KSR,结果表明,兔PGCs可以重编程为生殖干细胞(embryonic germ cells,EGCs),EGCs可分化为神经样细胞、上皮样细胞和拟胚体;从E10.5和E11.5的胎兔生殖嵴中分离的PGCs,体外培养增殖能力较强;基础培养液中同时添加RA、FK和4OHT时PGCs的集落数量较多,形态特征和细胞活性较好;培养液中加入KSR时,PGCs集落数量较多,形态特征较好.
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