【摘 要】
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目的 通过观察谷氨酸对脊髓小胶质细胞在形态和功能方面的改变,探计谷氨酸能否激活脊髓小胶质细胞以及激活的最佳浓度和时间点.方法 原代离体培养脊髓小胶质细胞,分别用细胞
【机 构】
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山西医科大学基础医学院生理教研室,太原,030001;山西医科大学第二附属医院眼科,太原,030001
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目的 通过观察谷氨酸对脊髓小胶质细胞在形态和功能方面的改变,探计谷氨酸能否激活脊髓小胶质细胞以及激活的最佳浓度和时间点.方法 原代离体培养脊髓小胶质细胞,分别用细胞培养液作为阴性对照组、50μM的ATP刺激细胞1小时作为阳性对照组以及谷氨酸通过不同浓度(500μM,1000μM和2000μM)分别作用三个不同的时间点(30min、1h和2h)作为实验组,通过免疫细胞化学方法 鉴定小胶质细胞.通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中肿瘤坏死因子(TNF-а)和一氧化氮(NO)的表达水平.结果 500μM的谷氨酸孵育1h,小胶质细胞释放TNF-а并开始被使激活,在2h TNF-а释放量大大增加(P<0.05).对于1000μM和2000μM组,TNF-а在三个时间点增加量都非常明显(P<0.05),但并不呈现时间依赖性和浓度依赖性趋势.在1000μM 2h组,TNF-а释放量最多(P<0.001).而与对照组相比,谷氨酸浓度达到1000μM和2000μM且孵育时间需持续2h.脊髓小胶质细胞释放的NO才会明显增加(P<0.05).结论谷氨酸能够激活小胶质细胞,可能1000μM是其激活小胶质细胞的最佳浓度.
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