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目的 为获知难或不能被克隆的ＤＮＡ片段。方法 建立一种以体外连接产物作为模板底物的取合酶链反应（Ｌｉｇａｔｉｏｎ－ＰＣＲ）法，通过染色体酶切消化混合物中目标ＤＮＡ片段的序列，未知的一端连接于一常用的克隆载体如ｐＭＣＬ２００上，利用载体的已知ＤＮＡ片段序列设计引物与目标ＤＮＡ片段序列已知一端的引物配对，进而扩增该目标ＤＮＡ片段并测定其部分序列。然后设计新引物并使用常规ＰＣＲ方法直接从染色体基因组６．