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目的 探讨他克莫司对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后成纤维细胞胶原生成的影响及其机制.方法 将人皮肤成纤维细胞分为4组:空白组、模型组、空白他克莫司组和模型他克莫司组.空白组细胞不做任何处理,模型组细胞用10 ng·mL-1 TGF-β1处理24 h,空白他克莫司组用200 nmol·L-1他克莫司处理24 h,模型他克莫司组同时加入10 ng·mL-1 TGF-β1和200 nmol·L-1他克莫司处理24 h.用比色法测定8种不同浓度(0为空白组,25,50,100,200,400,800,1600 nmol·L-1)他克莫司作用下成纤维细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量.以免疫印迹实验检测自噬相关蛋白、内质网凋亡蛋白、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)和转录因子EB(TFEB)的表达.结果 8种不同浓度他克莫司作用后,成纤维细胞LDH释放量分别为(99.33±5.52)％,(99.32±4.40)％,(99.32±4.95)％,(98.66±4.45)％,(98.80±6.31)％,(98.51±4.35)％,(106.29±6.03)％和(121.36±8.24)％;800 nmol·L-1以下浓度的他克莫司作用后,成纤维细胞LDH释放率与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05).空白组、模型组和他克莫司模型组的LC3Ⅱ表达比值分别为1.00±0.23,3.41±0.25和4.45±0.44;这3组的溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)表达比值分别为1.00±0.25,3.90±0.43和2.51±0.22;这3组的内质网凋亡蛋白糖调节蛋白78(GRP78)表达比值为1.00±0.21,1.94±0.28和3.10±0.29;这3组的Caspase 3蛋白比值分别为1.00±0.22,1.27±0.38和3.16±0.24;这3组的COLⅠ蛋白表达比值分别为1.00±0.29,3.26±0.34和2.09±0.31;这3组的TFEB蛋白表达比值为1.00±0.26,2.94±0.44和1.54±0.19.模型组与空白组相比,诱导成纤维细胞自噬水平上调和TFEB蛋白表达增加,促进TFEB核易位和胶原沉积,上述蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.01).他克莫司降低溶酶体功能,增加内质网应激,造成细胞凋亡,减少TFEB蛋白表达,降低胞质及胞核内TFEB荧光强度,抑制胶原沉积,与模型组相比,上述蛋白表达的差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 他克莫司通过抑制TFEB介导溶酶体降解功能,减少TGF-β1诱导的成纤维细胞表型转化和胶原生成.