抗小鼠H-Y抗原IgY抗体的纯化

• 作 者: 刘本成 药晨江 雷庆 李欣 周颖 徐汪节 李巧丽 王朝霞 乔
• 机 构: 上海交通大学生命科学技术学院
• 出 处: 上海交通大学学报：农业科学版
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: H-Y Ni—NTA 亲和层析 IGY H-Y Ni-NTA affinity chromatography IgY
• 基金项目: 上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字2003-1-3和2006-5-6）

用Ni—NTA柱纯化SMCY重组蛋白，将该蛋白作为配基偶联至CNBr活化的Sepharose 4B制成亲和层析柱，分离纯化抗H—Y抗原的特异性IgY抗体。结果表明：Ni—NTA柱纯化后，SMCY重组蛋白纯度可达到80％左右；亲和层析柱纯化可以使IgY抗体的纯度达到97％，经免疫组化检测，该抗体能够结合与雄性小鼠肝脏细胞表面，而不与雌性小鼠肝脏细胞发生结合。证实了经过纯化得到的高纯度IgY抗体具有很好的抗H—Y抗原特异性。通过该方法可纯化分离得到高纯度抗H—Y抗原IgY抗体。