【摘 要】
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构建了携带改造型hFⅧ(hFⅧ-BDDAK39)的核糖体基因区靶向表达载体pHrneo-BDDAK39,并将其转入人纤维肉瘤细胞(HT1080),检测其定点整合的能力及hFⅧ-BDDAK39的表达情况.结果显
【机 构】
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构建了携带改造型hFⅧ(hFⅧ-BDDAK39)的核糖体基因区靶向表达载体pHrneo-BDDAK39,并将其转入人纤维肉瘤细胞(HT1080),检测其定点整合的能力及hFⅧ-BDDAK39的表达情况.结果显示,pHrneo-BDDAK39能够成功地将hFⅧ-BDDAK39靶入到HT1080细胞的核糖体基因区,定点整合效率达到2.0×10~(-5),并且靶入的hFⅧ-BDDAK39能有效表达,表达量为(32±5)ng·10~6细胞~-1·24h~(-1).这为利用此靶向表达载体进行血友病A的基因治疗提供了重要的实验依据.
The constructed ribosome gene targeting vector pHrneo-BDDAK39 was transformed into human fibrosarcoma cells (HT1080), and its ability of site-specific integration and expression of hFⅧ-BDDAK39 The results showed that hRVIII-BDDAK39 could successfully target hFVIII-BDDAK39 into the ribosomal region of HT1080 cells, and the site-specific integration efficiency reached 2.0 × 10 -5, and hFⅧ-BDDAK39 could express efficiently and expressed (32 ± 5) ng · 10 ~ 6 cells ~ -1 · 24h ~ (-1), which provided an important experimental basis for the gene therapy of hemophilia A by using this targeting expression vector.
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