【摘 要】
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为建立创伤弧菌的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法,根据编码创伤弧菌DNA促旋酶的B亚单位蛋白(Gyrase Beta Subunit,gryB)的基因保守序列,设计RPA特异性引物,建立创伤弧菌g
【机 构】
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广东检验检疫技术中心,广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室,汕头海关
【基金项目】
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广东省基金团队项目(编号:S2012030006235);广东省科技计划(编号:2016A050503031);广东出入境检验检验局科技计划(编号:2017GDK48);广东省汕头市科技计划(编号:汕府科[2017]166号-38)
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为建立创伤弧菌的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法,根据编码创伤弧菌DNA促旋酶的B亚单位蛋白(Gyrase Beta Subunit,gryB)的基因保守序列,设计RPA特异性引物,建立创伤弧菌gryB基因的RPA检测方法并测试其特异性、灵敏度和应用效果。结果发现,建立的RPA检测方法特异性好,能够从创伤弧菌中检测到234 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;该方法的灵敏度与PCR相当,可达到0.1 ng/μL,应用检测结果也表明该方法与传统培养方法相当。因此
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