胰腺癌细胞FOXP3表达对DCs活化及其免疫功能的影响

• 作 者: 卢学嘉 吕瑛 马超 刘文佳 谢丽娟 邹晓平
• 机 构: 210093 南京，南京大学医学院附属鼓楼医院消化科,210093 南京，南京大学医学院附属鼓楼医院消化科,210093 南京，南京大学医学院附属鼓楼医院消化科,210093 南京，南京大学医学院附属
• 出 处: 中华胰腺病杂志
• 发表日期: 2015年15期
• 关键词: Pancreatic neoplasms Dendritic cells Tumor microenvironment FOXP3

目的

探讨胰腺癌细胞FOXP3表达对树突细胞(DCs)活化及其免疫功能的影响。

方法

设计并合成靶向FOXP3的siRNA(siRNA-FOXP3)及阴性对照siRNA(siRNA-NC)，转染胰腺癌PANC1细胞，ELISA法检测细胞培养上清IL-10和TGF-β1含量。分别收集两组转染的胰腺癌细胞上清液，与粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)及IL-4联合诱导DCs分化。流式细胞仪检测经转染及未转染细胞培养上清液处理后DCs免疫表型CD₈₆、CD₈₀、HLA-DR等的变化，ELISA法检测上清中IL-12p70、IFN-γ含量。将经上清液处理后的DCs与淋巴细胞共培养，CCK-8法检测各组DCs诱导的淋巴细胞增殖能力及活化的T细胞(CTLs)对胰腺癌细胞的杀伤性。

结果

与转染siRNA-NC的PANC1细胞比较，转染siRNA -FOXP3的PANC1细胞IL-10、TGF-β1分泌量显著减少[(8.93±3.06)ng/L比(26.60±5.57)ng/L，(2 544±78)ng/L比(2 856±92)ng/L]，其细胞培养上清处理后DCs的CD₈₆、HLA-DR阳性表达率显著增加[(28.10±3.11)%比(13.90±0.42)%，(66.15±4.17)%比(43.15±3.32)%]，IL-12p70、IFN-γ分泌量显著增加[(52.75±7.89)ng/L比(26.14±4.50)ng/L，(898.43±88.82)ng/L比(412.76±24.68)ng/L]，DCs与淋巴细胞以1∶5、1∶10、1∶20比例共培养后淋巴细胞的增殖显著加速[(95.27±3.80)%比(71.77±5.70)%，(78.97±5.73)%比(52.30±8.72)%，(57.60±4.36)%比(43.73±6.01)%]，以1∶20、1∶40比例培养后活化的CTL对PANC1细胞的杀伤率显著提高[(28.44±5.20)%比(8.82±2.29)%，(40.85±5.15)%比(17.38±4.86)%]，两组间的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。

结论

胰腺癌细胞FOXP3表达显著抑制DCs的活化及其免疫功能。