微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库的构建

• 作 者: 李文卉 罗建勋 殷宏 高金亮 关贵全 刘志杰 党志胜 马米玲
• 机 构: 中国农业科学院
• 出 处: 中国兽医科技
• 发表日期: 2005年12期
• 关键词: 微小牛蜱 CDNA表达文库 抗原基因 Boophilus microplus eDNA expression library antigen gene
• 基金项目: 国家科技攻关项目，中国科学院资助项目，JSPS国际合作项目

为了研究微小牛蜱功能性抗原基因,从微小牛蜱(Boophilus microplus)幼蜱中提取总RNA并分离纯化mRNA.采用Oligo(dT)引物合成双链cDNA,在其两端加EcoRⅠ、HindⅢ定向接头,用Mini Column Fractionation凝胶过滤柱纯化后定向克隆到λSCREEN载体.经体外包装,成功构建了我国微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库,铺板测定原始库容量为4.5×105PFU,扩增后的滴度为7.2×1010PFU/mL.