【摘 要】
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目的构建核转录因子Nrf2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)点突变逆病毒稳转细胞株,并检测其在A549人肺癌细胞中的表达效果,为基因靶向治疗提供研究基础。
【机 构】
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上海中医药大学附属上海市中西医结合医院,上海市杨浦区中心医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81772460),区域中医优势专科培育及提升项目(HGY-YSZK-2018-14)
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目的构建核转录因子Nrf2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)点突变逆病毒稳转细胞株,并检测其在A549人肺癌细胞中的表达效果,为基因靶向治疗提供研究基础。方法针对人Nrf2基因序列,扩增目的片段并与Teasy载体连接,构建Nrf2-Teasy重组质粒,用Fast Mutagenesis System对Nrf2进行定点诱变,使其第2号外显子有T35C和G37A的点突变。并将突变的Nrf2片段插入逆病毒载体pMSCV,构建pMSCV-MUT-N
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