胆盐诱导体外培养的食管黏膜上皮分化

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目的 探讨6种结合胆盐及其混合物是否抑制体外培养的正常食管黏膜细胞增殖、诱导其分化及其机制.方法 应用20~50 μmol/L的6种结合胆盐[甘氨酸胆盐(GC),甘氨酸鹅脱氧胆盐(GCDC),甘氨酸脱氧胆盐(GDC),牛磺酸胆盐(TC),牛磺酸鹅脱氧胆盐(TCDC),牛磺酸脱氧胆盐(TDC)]及其混合物分别干预体外培养的正常食管黏膜细胞不同时间(1、3和5 d);采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞增殖;碘化丙啶染色流式细胞仪分析细胞周期变化;细胞免疫化学法检测细胞角蛋白(CK)14,CK13阳性细胞百分率观察细胞分化;激光共聚焦显微镜检测胆盐诱导后细胞内钙离子变化.结果 GC对细胞的增殖无影响,而其余胆盐均抑制增殖;干预1和3 d时,除GC外,均引起细胞G0~G1比率增加,而S期比率下降.干预1、3和5 d时,CK13阳性细胞百分率随干预时间增加而增加,而CK14阳性细胞百分率则减少;其中以TC的作用为最强[第5天对照组CK13阳性细胞百分率为22%±7%,而TC组达74%±8%(P<0.01)];TC组和混合胆盐组细胞在加入胆盐的随后数分钟内即见到细胞内Ca2+增加,而GC组却未见此变化.结论 GDC、GCDC、TC、TDC、TCDC和混合胆盐均能促进细胞分化,抑制细胞增殖,而GC却无此作用;TC和混合胆盐可引起细胞内Ca2+的增加,即Ca2+参与了此诱导细胞分化的胞内信号途径。

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