仿刺参溶菌酶在重组酿酒酵母中的表达

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采用酿酒酵母MKP-0表达仿刺参溶菌酶蛋白(AjLys)。以质粒pMDl8-AjLys为模板,PCR扩增将组氨酸标签His-tag克隆到AjLys基因的N末端,构建克隆载体pMDl8-His6-AjLys。根据密码子偏好性,通过定点突变对AjLys蛋白第69、77和95位的3个精氨酸的密码子进行优化,得到克隆载体pMDl8-His6-AjLys(A69,77,95)。经SpeI/BglⅡ酶切,构建重组表达质粒pESC-LEU-Hise-AjLys和pESC-LEU—His6-AjLys(A69,77,95
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