【摘 要】
：
为了探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系,用基因重组技术将野生型和突变型(C203Y)b5RcDNA克
【机 构】
：
南京军区福州总医院全军医学检验中心福州 350025
论文部分内容阅读
为了探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系,用基因重组技术将野生型和突变型(C203Y)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达.Western印迹鉴定所表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白.应用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RC203Y融合蛋白.比较GST-b5R和GST-b5RC203Y酶活性及稳定性,发现野生型和突变型的酶活性基本相同.但与野生型酶相比,突变型酶对热的稳定性较差,对胰蛋白酶更加敏感.结果提示,C203Y突变可引起蛋白质二级结构改变而导致酶的稳定性下降.
其他文献
经国家科委核准,1997年国家自然科学奖授奖项目为51项.其中一等奖1项,二等奖8项,三等奖30项,四等奖12项.现将我院获一等奖及二等奖项目简介如下:
微化工技术是当前化学工程领域的研究前沿与热点.本文就微化工技术在均相、气-液和液-液两相反应体系中的应用, 结合具体研究范例阐释微反应器内进行化学反应的可行性.与传统
１９９７年度中国科学院自然科学奖和中国科学院科学技术进步奖（简称“两奖”）共奖励１７４项优秀科研成果，其中自然科学奖６８项（特等奖１项，一等奖１４项，二等奖３２项，三等奖２１项），科学技术进步奖１０６项（特等奖４项，一等奖
文章介绍了昆明植物所结合云南地区生物学科发展的区域特色,进行研究所定位和结构调整的做法与经验.
亲水亲油平衡(HLB)值是表征表面活性剂溶液性质的重要参数.它不仅是亲水、亲油基团数的函数,也与这些基团在分子链中的位置相关.过去基于基团贡献法的HLB值计算模型都忽略了
α-半乳糖苷酶是实现B→O血型转变、制备通用型血的关键工具酶.利用反转录PCR方法从中国海南Catimor咖啡豆中克隆α-半乳糖苷酶cDNA,插入嗜甲基酵母P.pastoris分泌表达栽体pP
通过RT-PCR,从人肝组织中扩增出血管形成抑制素(angiostatin)cDNA的K1片段,经DNA序列分析证实其正确性;将K1与GST融合并带上17个氨基酸的PKA底物磷酸化基序,IPTG诱导表达,以