【摘 要】
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为了构建高质量的纳米抗体库,研究采用硅基膜法(柱纯化试剂盒法)和沉淀法分别提取骆驼外周血淋巴细胞和脾脏总RNA,通过超微量分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及逆转录-聚合酶链反
【机 构】
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内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古骆驼研究院,内蒙古巴丹吉林737300
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为了构建高质量的纳米抗体库,研究采用硅基膜法(柱纯化试剂盒法)和沉淀法分别提取骆驼外周血淋巴细胞和脾脏总RNA,通过超微量分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测,对提取结果进行比较分析,并探究了TRIzol试剂与脾脏用量比例对RNA提取质量的影响,以筛选驼源样本RNA提取方法.结果 表明:沉淀法提取样本RNA的得率是硅基膜法的2倍以上,OD260/OD280值和OD260/OD230值也均处于正常范围内;硅基膜法所提取样本RNA的RT-PCR结果出现明亮的目的条带.而TRIzol的用量对脾脏组织RNA的提取质量不会有显著影响,仅对其得率有部分影响.说明用沉淀法提取样本RNA效果更好,而用硅基膜法提取的驼源RNA更适用于构建抗体文库.
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