【摘 要】
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目的:研究胃癌高、低发区差异基因型幽门螺杆(H pylori) 菌株对永生化的非肿瘤胃上皮细胞GES-1的损伤作用;并阐明H pylori致细胞损伤的分子机制．方法:通过常规HE染色、Gimsa染
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室
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目的:研究胃癌高、低发区差异基因型幽门螺杆(H pylori) 菌株对永生化的非肿瘤胃上皮细胞GES-1的损伤作用;并阐明H pylori致细胞损伤的分子机制．方法:通过常规HE染色、Gimsa染色、W-S银染色鉴定H pylori菌株,采用蛋白酶K及酚-氯仿抽提法提取DNA,PCR法扩增cagA、vacAsl、s2、mla、mlb、m2基因,对H pylori 因亚型进行检测．利用细胞和幽门螺杆菌共培养技术,观察胃癌高低发区差异基因亚型H pylori以及其他两种非差异基因型H pylori对胃上皮细胞系GES-1的损伤作用,并通过免疫细胞化学方法检测GES-1细胞8-OHdG的表达．结果:幽门螺杆菌对GES-1细胞具有损伤作用,随着作用时间的延长,GES-1细胞形态由贴壁的梭形变为圆形．细胞核染色质浓缩,呈新月形聚集于核缘,细胞质浓缩,可见空泡变性,死亡细胞逐渐增多．差异基因型H pylori对GES-1细胞的损伤程度比非差异基因型的损伤作用重．正常对照组 8-OHdG表达基本阴性(0．5%),而H pylori处理组GES-1细胞 8-OHdG表达阳性达98．5％,二者差异显著(P<0．01),有统计学意义．结论:胃癌高发区差异基因型H pylori即cagA+,vacAs1+／m1b+ 对胃上皮细胞GES-1具有更强损伤作用,其损伤具有时间依赖关系;H pylori可能通过增加胃上皮细胞8-OhdG表达而导致正常胃黏膜上皮细胞恶性转化．
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