结核分枝杆菌mpt64基因真核表达载体的构建及表达

• 作 者: 柏银兰 薛莹 徐志凯 高辉 王丽梅 师长宏 张海 樊爱琳
• 机 构: 第四军医大学微生物学教研室
• 出 处: 科学技术与工程
• 发表日期: 2007年15期
• 关键词: 结核分枝杆菌 MPT64 真核表达 Mycobacterium tuberculosis mpt64 expression
• 基金项目: 国家自然科学基金（30500432）、国家自然科学基金（30470097）资助

构建结核分枝杆菌分泌蛋白mpt64基因真核表达载体。通过PCR法从MTBH37Rv株基因组中扩增mpt64基因，插入pGEM-T-easy载体中，序列测定正确后，将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3．1（-），重组质粒酶切鉴定正确后，以Lipo-fectamine2000转染COS-7细胞后，分别以RT-PCR方法检测mRNA表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。构建了真核表达载体pcDNA-mpt64，RT-PCR结果证明mpt64基因可在COS-7细胞中转录，用间接免疫荧光检测，有表达mpt64蛋