X射线诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的适应性反应及相关miRNA筛选的研究

来源 :国际放射医学核医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:k88ls06
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究X射线辐射诱导非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞凋亡的适应性反应,并筛选适应性反应相关的微RNA (miRNA)。方法:将NSCLC A549细胞分为6组,包括50 mGy+20 Gy、200 mGy+20 Gy、20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组及对照组(0 Gy),前2组细胞分别用50、200 mGy初始剂量进行照射,培养6 h后用20 Gy的效应剂量进行照射,20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组同时进行照射。培养24 h后使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。利用小RNA测序技术筛选差异表达miRNA,并对其靶基因进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路的功能富集分析。采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对部分差异表达miRNA进行验证。2组间数据的比较采用Welch n t检验。n 结果:50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组的A549细胞早期凋亡率分别为(1.81±0.11)%和(2.17±0.19)%,低于20 Gy照射组的(4.54±0.23)%,且差异均有统计学意义(n t=10.680、8.006,均n P<0.01)。与20 Gy照射组相比,50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组共同差异表达趋势miRNA有1个上调(miR-3662)、15个下调(miR-185-3p、miR-1908-5p、miR-1307-5p、miR-182-3p、miR-92a-3p、miR-582-5p、miR-501-3p、miR-138-5P、miR-1260b、miR-484、miR-378d、miR- 193b-3P、miR-127-3p、miR-1303及miR-654-5p)。GO富集分析结果显示,差异表达miRNA调控靶基因功能显著富集于细胞通讯调节、代谢过程的正向调节、代谢信号的调节、酶结合及催化活性等过程。KEGG富集分析结果显示,靶基因相关信号通路显著富集于溶酶体、丝裂原活化蛋白激酶、Ras和内吞作用等信号通路。qRT-PCR检测结果显示,miRNA表达情况与基因芯片结果趋势一致(10个miRNA表达水平得到验证)。n 结论:X射线50、200 mGy照射剂量均能诱导NSCLC A549细胞凋亡的适应性反应,并筛选到一组共同差异表达的miRNA,可能在X射线辐射诱导细胞凋亡的适应性反应中发挥了重要作用,有可能成为调节电离辐射生物效应的潜在靶点。“,”Objective:To study the adaptive response of the X-ray radiation to apoptosis of non-small cell lung cancer (NSCLC) A549 cell, and to screen microRNAs (miRNAs) related to the adaptive effect of radiation.Methods:NSCLC A549 cells were irradiated in 6 groups, namely, the 50 mGy+20 Gy, 200 mGy+20 Gy, 20 Gy, 50 mGy, and 200 mGy irradiation groups and the 0 Gy as control group. The cells in the first two groups were irradiated with initial doses of 50 mGy and 200 mGy respectively, and were then irradiated with an effective dose of 20 Gy after culturs for 6 hours. The 20 Gy, 50 mGy, and 200 mGy groups were irradiated at the same time. The apoptosis of A549 cells was detected by flow cytometry after 24 hours of culturing. Small RNA sequencing was performing to detect the expression of miRNAs in different irradiation groups, and quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was used to verify some differentially expressed miRNAs. The target genes of differentially expressed miRNAs were predicted and then analyzed via gene ontology (GO) and Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG) analyses. The data between two groups were compared by performing Welch\'sn t-test.n Results:The cell apoptosis rates of A549 cells in the 50 mGy+20 Gy and 200 mGy+ 20 Gy groups were (1.81±0.11)% and (2.17±0.19)% respectively, which were significantly lower than (4.54±0.23)% in the 20 Gy group (n t=10.680, 8.006; all n P<0.01). Meanwhile, the small RNA sequencing results show that compared with the 20 Gy irradiation group, 1 miRNA (miR-3662) was up-regulated and 15 miRNAs (miR-185-3p, miR-1908-5p, miR-1307-5p, miR-182-3p, miR-92a-3p, miR-582-5p, miR-501-3p, miR-138-5P, miR-1260b, miR-484, miR-378d, miR-193b-3P, miR-127-3p, miR-1303 and miR-654-5p) were down-regulated in the 50 mGy+20 Gy and 200 mGy+20 Gy irradiation groups. GO enrichment analysis reveal that the functions of target genes were significantly enriched in cell communication regulation, positive regulation of the metabolic process, regulation of the metabolic signal, enzyme binding and catalytic activity, whereas the KEGG analysis showed that the target genes related signal pathways were significantly enriched in lysosome, mitogen-activated protein kinase, Ras, endocytosis and other signal pathways. qRT-PCR was used to validate the expression of miRNAs, and the expression levels of 10 miRNAs were consistent with the sequencing results.n Conclusions:The X-ray of 50 mGy and 200 mGy radiation dose can induce an adaptive response in the cell apoptosis of A549 cells. A group of differently expressed miRNAs detected in 50 mGy+20 Gy and 200 mGy+20 Gy groups may play important roles in the adaptive response of low dose radiation and may become potential targets to regulate have effects of radiation.
其他文献
目的 探讨预见性护理对阴道分娩产妇产后出血的临床预防效果.方法 选择2017年6月~2020年6月我院的50例阴道分娩产妇,随机分为两组.对照组采用常规分娩护理,观察组采用预见性护理.结果 观察组的会阴撕裂伤率为8.00 %(2/25),产后出血率为4.00 %(1/25),明显低于对照组(P<0.05);观察组的产后2小时、产后24小时出血量明显低于对照组(P<0.05);观察组阴道分娩产妇产后的恐惧、抑郁、紧张以及焦虑等不良情绪发生率为12.00%(3/25),明显低于对照组阴道分娩产妇的28.00%
脊柱感染(SI)是一种由致病菌沿中轴骨血行播散引起的疾病。虽然MRI是诊断SI的首选影像学检查方法,但在诊断和鉴别诊断等方面亦有其局限性。n 18F-氟脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT作为一种一站式的全身检查方法,在鉴别感染原发灶和脊柱术后感染及评估治疗疗效等方面较具优势。笔者重点从SI的诊断、鉴别诊断和疗效评估三个方面综述n 18F-FDG PET/CT在SI诊治中的应用及其与MRI的比较。n “,”Spinal infection (SI) is a disease caused
目的:对n 90Sr-n 90Y敷贴治疗进行EBT3胶片剂量的测量,为临床应用提供一种快捷的剂量验证方法。n 方法:选用能量响应较好的辐射直接显影EBT3胶片,并与固体水模进行比较,通过直线加速器建立0~500 cGy的胶片灰度-剂量标准曲线并检测其组织等效性。将20片6 cm×6 cm的EBT3胶片(每张胶片厚0.28 mm)重叠放置,将n 90Sr-n 90Y敷贴器放置在胶片最顶层,辐照4 min。通过灰度-剂量标准曲线计算出每张胶片中心轴附近的平均吸收
射线照射是现代医疗中常用的方法之一,尤其在恶性肿瘤的治疗中应用广泛。但在放疗过程中,射线可对骨相关细胞、骨微观结构产生直接影响,或对骨髓、脉管系统等产生间接影响,从而造成骨损伤。尽管目前的研究成果对放射性骨损伤的认识并不透彻,但因其具有普遍性,故近年来逐渐受到医疗工作者的重视。笔者对射线引起的骨骼系统损伤及其预防和治疗进行综述。“,”Radiation is one of the commonly used methods in modern medical treatment, especially i
目的 探讨镜像疗法联合心理干预对急性期脑卒中患者康复护理应用价值.方法 选取2017年6月2019年6月于我院就诊的86例急性期脑卒中患者,按随机数字表法分为两组,各43例.对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上采用镜像疗法联合心理干预.对比两组运动功能、心理状态、日常生活能力、平衡能力及步行能力.结果 干预前两组运动功能、心理状态、日常生活能力、平衡能力、步行能力对比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组干预8周后运动功能(51.52±8.59)分、日常生活能力(68.37±4.14)分、平衡能力
与常规CT和MRI影像学检查相比,n 68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)-生长抑素类似物(SSA) PET/CT在神经内分泌肿瘤(NEN)的诊断中具有较高的灵敏度和特异度,同时,在疗效评价和预后评估等方面也有重要的指导价值。n 18F-氟脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT虽然在NEN的诊断中未被常规推荐,但其在良恶性肿瘤的鉴别诊断和预后评估中可提供额外的信息。笔者就近年来n 18F-FDG和n 68Ga-DOTA-SSA双示踪剂P
心包炎通常是全身多个系统疾病的一部分以及某些全身疾病的首发表现。因此,找到并去除全身疾病的病因,尽早干预并延缓疾病的进程则有助于预防长期并发症,改善患者预后。由于心包活检获得心包积液或心包组织的难度相对较大,阳性率较低,因此,鉴定心包炎的病因一直都是难点。n 18F-FDG PET/CT可一次性将全身的生理代谢信息和解剖学信息融合,在判定心包炎的病因方面具有重要价值。另外,其在确定疾病的分期和分级、疗效评估和预后,尤其是早期鉴别肿瘤复发、肿瘤再分期、寻找肿瘤原发病灶和定位放疗生物靶区等方面都极具优
目的 浅析康复科护士培训采用模块化教学联合微课对理论考核成绩的效果.方法 选择我院康复科2020年1月至2020年9月间接收的30例护士培训,给予模块化教学联合微课教学模式,设为观察组.再回顾性分析我院康复科2019年1月至2019年9月间接收的30例护士培训,采取的是常规教学模式,设为对照组.比较两组教学效果.结果 观察组护士理论知识、基础护理技能、专科护理技能、综合护理技能成绩、巩固理论知识、培养解决问题能力、培养沟通交际能力、增强学习主观能动性、提高观察病情能力、提高技术操作能力、提升评判性思维能力
目的 探讨实施护士分层管理对建立优质护理服务长效机制的效果.方法 通过对护士进行层级划分,和按层级对护士进行培训、考核及晋级,比较实施分层管理前后护士对其岗位的满意度级及离职率.结果 自2015年实施护士分层管理以来,护士满意度从(90.52±3.66)分提高到(95.82±3.35)分(P<0.01),护士离职率从3.75%降低到2.10%.结论 实施护士分层管理后护士队伍稳定,护士职业价值感提升.
目的 探讨开放性骨折伴大出血患者术前凝血状态及采取急救护理的临床止血效果.方法 选取开放性骨折伴大出血患者50例为观察组,并根据护理方法不同将其分为观察1组、观察2组,各25例,分别接受常规护理与循证急救护理,另选取同期来我院体检正常的50名志愿者作为对照组,比较观察组与对照组之间凝血状态的差异,再观察不同护理方法对患者凝血功能及预后恢复的影响.结果 术前观察1、2组的PLT、FIB均低于对照组(P<0.05),PT、APTT与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);术后观察1、2组的凝血功能均有所好