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目的研究以cGMP为特异底物的磷酸二酯酶5(PDE5)的水解酶活性及PDE5选择性抑制剂西地那非(sildenafil)的抑制作用。方法以牛阴茎海绵体为原料,通过快速蛋白液相系统分离纯化得到PDE同工酶,然后以3H-cGMP为底物,经纯化的PDE同工酶催化水解为3H-GMP,进一步在含5′-核苷酸酶的蛇毒液作用下,脱去5′-磷酸生成3H-鸟苷,在闪烁剂激发下测定3H-鸟苷的变化,绘制PDE活性曲线。以不同剂量的PDE5选择性抑制剂西地那非作用于PDE5,经Dixon Plots法处理结果以观察西地那非的抑