J亚群禽白血病Hrb-1分离株env基因克隆及gp85杆状病毒表达载体的构建

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shi123abc

【摘要】

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自哈尔滨某送检患病鸡群中分离出一株病毒，经RT-PCR检测、SPF鸡胚成纤维细胞增殖后，获取其前病毒DNA，采用依据原型毒株HPRS-103 cDNA序列设计并合成的一对引物，PCR扩增病毒的囊膜

【作者】

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付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅郭艳王英张厚双尹训南

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2004年2期

【关键词】

：

J亚群禽白血病病毒gp85基因克隆载体构建杆状病毒表达系统 gp85 gene of ALV-J clone vector construction ba

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自哈尔滨某送检患病鸡群中分离出一株病毒，经RT-PCR检测、SPF鸡胚成纤维细胞增殖后，获取其前病毒DNA，采用依据原型毒株HPRS-103 cDNA序列设计并合成的一对引物，PCR扩增病毒的囊膜基因，连接pMD18-T载体并转化大肠杆菌JM109，培养后提取质粒分别用HindⅢ，BamHI进行单酶切和双酶切鉴定，得到了阳性重组质粒pMD18-T-Hrbl／env，对其进行PstⅠ酶切，回收包含J亚群禽白血病病毒株Hrb-lgp85基因的997bp片段，应用Bac to Bac杆状病毒表达系统，将外源片段

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