酶促磷酸化法合成氚标记核苷三磷酸

• 作 者: 沈德存 计林贞 廖莎
• 机 构: 中国原子能科学研究院,中国原子能科学研究院,中国原子能科学研究院 北京,北京,北京
• 出 处: 原子能科学技术
• 发表日期: 1987年01期
• 关键词: 氚标记 核苷三磷酸 核苷一磷酸 酶促 酶促磷酸化 催化氚卤置换 核苷二磷酸 酸化法 比活度 放化纯度

以5 BrUMP、5 BrCMP、8 BrAMP及8 BrGMP为原料,使用催化氚卤置换法制备了[5-~3H]UMP、[5-~3H]CMP、[8-~3H]AMP及[8-~3H]GMP。再用从啤酒鲜酵母中提取的粗酶,经酶促磷酸化,将[5-~3H]UMP、[5-~3H]CMP、[8-~3H]AMP及[8-~3H]GMP进一步合成了[5-~3H]UTP、[5-~3H]CTP、[8-~3H]ATP及[8-~3H]GTP,并用纸层析方法进行纯化。作为副产品,还得到了氚标记核苷一磷酸和氚标记核苷二磷酸。产品的比活度为14—19 Ci/mmol,放化纯度大于98%。