【摘 要】
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目的 探讨miR?145?5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,以及肝癌细胞系SMMC?7721、SK?Hep1,采用RT?PCR法检测组织中miR?145?5p和LOX的表达.分别将miR?145?5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC?7721或SK?Hep1,同时用LOX过表达质粒和过表达miR?145?5p慢病毒载体
【机 构】
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530021 南宁 广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科
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目的 探讨miR?145?5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,以及肝癌细胞系SMMC?7721、SK?Hep1,采用RT?PCR法检测组织中miR?145?5p和LOX的表达.分别将miR?145?5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC?7721或SK?Hep1,同时用LOX过表达质粒和过表达miR?145?5p慢病毒载体共转染SMMC?7721细胞,各转染组均设置相应阴性对照组及空白对照组;然后采用Transwell实验检测肝癌细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测LOX蛋白的表达水平;通过TargetScan数据库预测miR?145?5p的靶点,并利用Cluster Profiler包进行GO和KEGG富集分析.结果 qRT?PCR检测结果显示,miR?145?5p在癌旁正常组织中的表达高于肝癌组织(4.196±2.288 vs 2.835±1.817,P<0.0001);LOX在肝癌组织中的表达高于癌旁正常组织(12.17±1.369 vs 11.26±1.556,P<0.001).Transwell检测结果显示,过表达LOX能促进肝癌细胞侵袭、迁移,敲低LOX则抑制肝癌细胞侵袭、迁移(均P<0.05);过表达miR?145?5p能抑制肝癌细胞的侵袭、迁移能力,LOX过表达能逆转miR?145?5p对SMMC?7721细胞迁移和侵袭的抑制能力.TargetScan数据库预测显示,LOX是miR?145?5p的靶基因.Western blot检测结果显示,miR?145?5p能抑制LOX蛋白表达水平(P<0.001).结论 miR?145?5p在肝癌组织中低表达,LOX则高表达,miR?145?5p可能通过负向调控LOX抑制肝癌细胞侵袭和迁移.
其他文献
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N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)是重要的离子型谷氨酸受体,具有配体及电压双重门控离子通道特性,组成及功能复杂,分布广泛,在多种疾病或应激状态的病理生理进程中起着关键作用.其可通过线粒体及内质网损伤、活性氧与过氧亚硝酸盐生成、丝裂原活化蛋白激酶及钙蛋白酶激活等不同途径介导细胞凋亡.本文就NMDAR的结构分布、生物特性及其介导的信号通路在细胞凋亡中作用机制等方面进行综述.
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