【摘 要】
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目的 研究β-1,4-半乳糖基转移酶I(β-1,4-galactosyltransferase I,β-1,4-GalT I)在CD4^+TH中的表达与定位以及β-1,4-GalT I对CD4^+ TH细胞黏附能力的影响。方法采用免疫磁珠阳性分选法分离纯化CD4^+ TH细胞,通过RT-PCR、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定CD4^+ TH细胞中β-1,4-GaIT I的表达与定位;分别用
【机 构】
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南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室,226001,南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室,226001,南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室,226001,南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室
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目的 研究β-1,4-半乳糖基转移酶I(β-1,4-galactosyltransferase I,β-1,4-GalT I)在CD4^+TH中的表达与定位以及β-1,4-GalT I对CD4^+ TH细胞黏附能力的影响。方法采用免疫磁珠阳性分选法分离纯化CD4^+ TH细胞,通过RT-PCR、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定CD4^+ TH细胞中β-1,4-GaIT I的表达与定位;分别用rhIL-2、rhIL-12、rhIL-4等细胞因子组合诱导CD4^+ TH细胞活化分化,通过半定量RT-PCR、FCM检测CD4^+ TH细胞中β-1,4-GaIT I的表达变化,运用层黏连蛋白结合实验比较CD4^+ TH细胞黏附能力的改变;用α-乳清蛋白干扰CD4^+ TH细胞表面β-1,4-GaIT I的活性及底物特异性,用层黏连蛋白结合实验分析其对CD4^+ TH细胞黏附能力的影响。结果CD4^+ TH细胞表面和细胞浆内表达长型和短型β-1,4-GalT I;rhIL-2活化的CD4^+ TH细胞长型β-1,4-GaIT I mRNA水平及细胞膜表面β-1,4-GaIT I表达水平、细胞黏附能力均高于未经活化的CD4^+ TH细胞,rhIL-2+rhIL-12诱导培养的CD4^+ TH细胞增强更明显;CD4^+ TH细胞长型β-1,4-GaIT I mRNA水平及细胞膜表面β-1,4-GaIT I表达水平均与CD4^+ TH细胞黏附能力呈正相关;α-乳清蛋白干扰后CD4^+ TH细胞黏附能力降低。结论β-1,4-GalT I在CD4^+ TH细胞中表达,且与细胞黏附能力密切相关,提示β-1,4-GalT I可能在CD4^+ TH细胞的黏附过程中发挥重要作用。
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