探讨WW域结合蛋白2(WBP2)对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和代谢的影响及其机制。
方法2015年6月到2018年6月安阳市人民医院收集正常脑胶质和脑胶质瘤组织59例，采用免疫组织化学分析脑胶质和胶质瘤组织中WBP2蛋白的表达水平。采用WBP2短发卡RNA(shRNA)和对照shRNA慢病毒感染U251脑胶质瘤细胞株，建立WBP2沉默和对照细胞株，分别为实验组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色分析两组细胞的增殖能力；采用Transwell分析两组细胞的迁移能力；采用异种移植瘤模型分析两组细胞在体内的增殖能力。采用乳酸试剂盒分析两组细胞乳酸分泌。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析糖酵解甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的表达。采用t检验。
结果与正常脑胶质细胞(54.31±5.69)比较，脑胶质瘤组织中WBP2蛋白表达水平(169.57±10.69)显著升高，差异有统计学意义(t＝4.312，P<0.01)。与对照组细胞(1.59±0.26)比较，实验组细胞72 h增殖能力(1.05±0.15)明显下降，差异有统计学意义(t＝3.105，P<0.05)。与对照组细胞EdU染色率[(67.25±6.98)%]比较，实验组EdU染色率[(19.33±4.89)%]显著下降，差异有统计学意义(t＝2.954，P<0.05)。实验组细胞迁移数量[(64.32±8.91)个]较对照组[(21.38±11.20)个]明显下降，差异有统计学意义(t＝3.984，P<0.01)。实验组细胞培养上清乳酸[(68.54±6.87) μmol/L]含量较对照组[(100.85±9.51) μmol/L]显著下调，差异有统计学意义(t＝3.029，P<0.05)。
结论WBP2蛋白在脑胶质瘤组织中呈高表达，参与胶质瘤细胞的增殖和迁移，并可调节肿瘤细胞糖酵解。