人肺癌细胞NHE—1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

• 作 者: 黄桂君 吴国明
• 机 构: 第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所
• 出 处: 第三军医大学学报
• 发表日期: 2000年6期
• 关键词: NHE-1基因 肺肿瘤 反义技术 重组载体 克隆 NHE-1 gene pulmonary neoplasm antisense technology r
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目!(39900067)

构建人肺癌细胞Ｎａ＾＋／Ｈ＾＋交换泵－１（Ｎａ＾＋／Ｈ＾＋ｅｃｘｈａｎｇｅｒ－１，ＮＨＥ－１）基因的反义表达载体，为将来能在体内应用抑制ＮＨＥ－１基因表达的肿瘤治疗奠定基础。方法采用ＰＣＲ技术从人肺癌Ａ５４９细胞基因组中克隆出长为４５４ｂｐ的ＮＨＥ－１基因外显子部分序列，在上、下游引物５’－端带上ＢａｎＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ酶切位点。然后将该片段反向插入逆转录病毒载体ＰＬＸＳＮ的多克隆位点。最后对产生的