大鼠肝细胞热适应差异表达基因消减文库的构建与鉴定

• 作 者: 肖军 邹飞 蔡绍曦 金玥
• 机 构: 第一军医大学,第一军医大学
• 出 处: 中国病理生理杂志
• 发表日期: 2004年6期
• 关键词: 热适应 基因 抑制性消减杂交 大鼠 Heat adaptation Genes Suppression subtractive hybridization
• 基金项目: 国家自然科学基金，广东省自然科学基金

目的:构建大鼠肝细胞热适应差异表达基因消减文库.方法:实验采用热适应大鼠模型、常温对照.提取肝组织mRNA,反转录cDNA并酶切、接头连接后分别以其中一组cDNA片段为tester,另一组为driver进行抑制性消减杂交(SSH)构建消减文库.PCR扩增文库和未消减对照样品中的G3PDH基因以对比评估文库特异性.初步分离、筛选以评估文库的可靠性.结果:PCR证实文库中G3PDH丰度大幅低于对照组,说明文库特异性较高.从文库中分离获得300个目的基因片段,其中27个经鉴定为差异表达基因,证实文库高效可靠.结