组织内HRP定量测定的新方法——TMB生化法

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辣根过氧化物酶(HRP)是目前国内外广为流行的一个标记酶。但HRP目前仍多用于形态学定性和定位观察。虽然Lundquist等人发表过HRP生化测定的报道,但由于所用联大茴香胺法灵敏度较低,在微量组织中仍嫌不足。四甲基联苯胺(TMB)由于灵敏度较高是目前较普遍使用的一种HRP组化呈色反应色原。Mesulam曾因TMB是脂溶性有机物而认为它不宜用于生化测定。经过摸索,我们证明TMB不但能用于分光光度计测定HRP,无沉淀产生,而且具有灵敏度高、步骤简单、无毒等优点,最少可测1PgHRP,较联大茴香胺法灵敏度高约 Horseradish peroxidase (HRP) is a widely used marker enzyme at home and abroad. However, HRP is still used for morphological qualitative and positioning observation. Although Lundquist et al. Published reports on biochemical assays of HRP, the lack of sensitivity due to the combination of dianisidine is not enough in trace tissues. Tetramethylbenzidine (TMB) is a HRP histone chromogen that is currently more commonly used due to its higher sensitivity. Mesulam once considered TMB a fat-soluble organism and is not suitable for biochemical assays. After exploration, we proved that TMB can not only be used for spectrophotometer determination of HRP, no precipitation, but also has the advantages of high sensitivity, simple steps, non-toxic, at least measurable 1PgHRP,
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