牛瑟氏泰勒虫P23主要表面蛋白基因的克隆及原核表达

• 作 者: 李文学 李海峰 金清洙
• 机 构: 延边大学农学院,吉林省延吉市动物卫生监督所
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2010年16期
• 关键词: 牛瑟氏泰勒虫病 表面蛋白基因 克隆人 原核表达 SURFACE PROTEIN Major Western-blotting SURFACE PROTEIN f
• 基金项目: 吉林省科技发展计划项目（20050703-4）

[目的]研究牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因的克隆及原核表达。[方法]采用PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫中国延边株P23基因片段,将扩增产物克隆入pMD18-T载体构建重组质粒pMD18-P23,经PCR、双酶切鉴定后测序;将目的基因片段亚克隆入表达载体pGEX-4T-1构建重组表达质粒pGEX-4T-P23,转化宿主菌BL21获得重组菌。通过对诱导条件的优化,根据SDS-PAGE确定表达蛋白的最佳表达条件;Western-blotting检测表达蛋白的反应原性。[结果]所克隆的牛瑟氏泰勒虫P23基因片段长50