猪细小病毒VP2的原核表达及间接ELISA方法的建立

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含有猪细小病毒结果蛋白VP2基因的重组质粒pET32c—VP2,转入表达宿主菌BL21中,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,重组VP2蛋白高效表达,以包涵体形式存在,经变、复性和纯化后,Western blot显示有良好的生物活性。纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最佳包被浓度为3.1μg/mL;血清最佳稀释度为1:100,阳性标准初步定为0D特检血清≥10.4且OD待检血清/OD标准阴性值≥2.1。
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