传染性造血器官坏死病毒糖蛋白抗血清的制备及应用

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应用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)从传染性造血器官坏死病毒(Infectious hemato poietic necrosis virus,IHNV)感染的细胞悬液克隆病毒的糖蛋白基因,将其亚克隆至原核表达载体pCWori,转化到大肠杆菌DH5d,通过发酵大肠杆菌制备病毒糖蛋白。经SDS—PAGE分析,诱导表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,使用Ni—NTA亲和层析柱在变性条件下进行纯化并透析复性,最终得到了较高纯度的可溶性糖蛋白,分子量约为57kDa。Western—blot分析结果显示,所表
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