【摘 要】
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目的 研究云南省宣威地区肺癌(宣威肺癌)细胞系XLA-07在葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD)条件下的增殖机制,观察宣威肺癌在营养剥夺条件下的代谢途径,确定限制宣威肺癌生长的代谢途径,为宣威肺癌靶向代谢治疗提供建议.方法 检测培养基在GD情况下细胞的增殖情况,使用Countstar自动细胞计数仪计数;使用EdU-555细胞增殖检测试剂盒检测细胞的增殖情况;Western Blot检测转录激活因子4(activated transcription factor 4,ATF4)以及丝氨
【机 构】
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昆明医科大学公共卫生学院环境卫生与职业医学系,云南昆明650500
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目的 研究云南省宣威地区肺癌(宣威肺癌)细胞系XLA-07在葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD)条件下的增殖机制,观察宣威肺癌在营养剥夺条件下的代谢途径,确定限制宣威肺癌生长的代谢途径,为宣威肺癌靶向代谢治疗提供建议.方法 检测培养基在GD情况下细胞的增殖情况,使用Countstar自动细胞计数仪计数;使用EdU-555细胞增殖检测试剂盒检测细胞的增殖情况;Western Blot检测转录激活因子4(activated transcription factor 4,ATF4)以及丝氨酸合成途径相关代谢酶磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)、磷酸丝氨酸转氨酶 1(phosphoserine aminotransferase 1,PSAT1)、磷酸丝氨酸磷酸酶(phosphoserine phosphatase,PSPH)、丝氨酸羟甲基转移酶2(serine hydroxymethyltransferase 2,SHMT2)和亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 1,MTHFD1)表达改变.结果 细胞计数和细胞增殖实验结果显示,在GD处理72 h后,宣威肺癌XLA-07仍继续增殖;Westermblot结果显示,在GD条件下宣威肺癌XLA-07能上调ATF4的表达(P＜0.05),并上调丝氨酸合成途径相关代谢酶PHGDH、PSAT1、PSPH、SHMT2和MTHFD1的表达(均P＜0.05).结论 宣威肺癌XLA-07能在GD的营养压力条件下继续增殖;通过上调ATF4及丝氨酸合成酶PHGDH、PSAT1和PSPH合成大量丝氨酸,从而合成更多还原型辅酶Ⅱ(coenzyme Ⅱ,NADPH)、还原型辅酶Ⅰ(coenzyme Ⅰ,NADH)和谷胱甘肽(glutathione,GSH),降低活性氧(active oxygen,ROS)水平,适应GD培养条件下的营养压力,并促进恶性肿瘤细胞增殖.
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