【摘 要】
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目的 比较常规聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR (real-timequantitative PCR,qPCR)和环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplific
【机 构】
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农业部禽类产品质量安全风险评估实验室,扬州 225125中国农业科学院家禽研究所,扬州 225125;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225125;
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目的 比较常规聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光定量PCR (real-timequantitative PCR,qPCR)和环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对金黄色葡萄球菌的检测效果.方法 以金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)标准菌株(ATCC6538)DNA为模板,以耐热核酸酶(Nuc)基因为靶标,采用常规PCR、qPCR和LAMP对其进行扩增并比较其检测灵敏度,同时对鸡蛋中金黄色葡萄球菌的检出率进行比较.结果 常规PCR对S.aureus的检测灵敏度为400个基因拷贝数,低于实时荧光定量PCR和LAMP的40个基因拷贝数的检出限.在实际样品检测中常规PCR对50份鸡蛋外壳样品中S.aureus的检出率为6％,qPCR和LAMP的检出率分别为10％,而在鸡蛋内容物中均未检测到.结论 3种检测方法检测S.aureus均具有较高的灵敏度,但常规PCR的灵敏度低于qPCR和LAMP检测方法,qPCR需要昂贵的仪器,不适合基层现场应用,而LAMP方法简单、快捷,具有良好的应用前景.
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