【摘 要】
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目的 使用肺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤,应用芪珍胶囊进行干预,探讨上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)在肿瘤中的作用机制.方法 常规培养人肺癌细胞株A549注射于Balb/c裸鼠皮下制备动物模型.模型制备成功后裸鼠随机分为芪珍胶囊组和对照组,每组8只.芪珍胶囊组给予芪珍胶囊溶液(4.5 g/kg)经口灌胃给药,每日一次;对照组瘤内注射等量无菌氯化钠注射液.每3日 估算一次肿瘤体积.两组均干预6周后处死裸鼠,取出皮下肿瘤,测量其重量.CCK-8
【机 构】
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浙江中医药大学,杭州310053;宁波大昌药业有限公司;河北医科大学第四医院外科;河北省人民医院检验科
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目的 使用肺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤,应用芪珍胶囊进行干预,探讨上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)在肿瘤中的作用机制.方法 常规培养人肺癌细胞株A549注射于Balb/c裸鼠皮下制备动物模型.模型制备成功后裸鼠随机分为芪珍胶囊组和对照组,每组8只.芪珍胶囊组给予芪珍胶囊溶液(4.5 g/kg)经口灌胃给药,每日一次;对照组瘤内注射等量无菌氯化钠注射液.每3日 估算一次肿瘤体积.两组均干预6周后处死裸鼠,取出皮下肿瘤,测量其重量.CCK-8法检测两组肿瘤细胞活性.划痕实验检测两组细胞的迁移能力.荧光实时定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹(Western Blot,WB)检测两组肿瘤EMT标志物E-钙粘素(E-cadherin)、N-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA和蛋白水平.结果 与对照组比较,芪珍胶囊组Balb/c裸鼠皮下移植瘤的体积和重量都低于对照组,从3周起体积差异有统计学意义(3周:t=-3.097,P＜0.01;4周:t=-4.516,P＜0.01;5周:t=-3.896,P＜0.01;6周:t=-5.075,P＜0.01),重量差异有统计学意义(t=-4.147,P＜0.01).芪珍胶囊组肿瘤细胞活性在48 h和72 h明显低于对照组(t=-4.084,P＜0.01;t=-7.540,P＜0.01),细胞迁移率明显低于对照组(t=-6.249,P＜0.01),穿膜细胞数明显少于对照组(t=-9.773,P＜0.01).qRT-PCR及 WB 结果均显示,芪珍胶囊组 N-cadherin、Vimentin、MMP-9的 mRNA 和蛋白表达低于对照组,而E-cadherin表达高于对照组(P＜0.01).结论 肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤能够较好地模拟实体肿瘤的生长过程,EMT在其中发挥了重要作用,芪珍胶囊能够通过抑制肿瘤EMT延缓移植瘤的生长.
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