【摘 要】
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目的 研究氟非尼酮(AKF-PD)对百草枯(PQ)中毒致肺纤维化的影响及其moTOR信号通路的调控作用,探讨氟非尼酮对百草枯中毒致肺纤维化的作用及机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、PQ组、PQ+ AKF-PD组、AKF-PD组.通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组肺组织形态变化,分光光度法检测SOD、MDA、HYP含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析TGF-β1、E-Cadherin、α-SMA蛋白表达水平;将肺上皮细胞(HPAEpiC)分为对照组、PQ组、PQ+ A
【机 构】
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410000长沙,湖南师范大学附属第一医院药学部;410000长沙,湖南师范大学附属第一医院急救研究所
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目的 研究氟非尼酮(AKF-PD)对百草枯(PQ)中毒致肺纤维化的影响及其moTOR信号通路的调控作用,探讨氟非尼酮对百草枯中毒致肺纤维化的作用及机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、PQ组、PQ+ AKF-PD组、AKF-PD组.通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组肺组织形态变化,分光光度法检测SOD、MDA、HYP含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析TGF-β1、E-Cadherin、α-SMA蛋白表达水平;将肺上皮细胞(HPAEpiC)分为对照组、PQ组、PQ+ AKF-PD组、AKF-PD组,用百草枯诱导肺上皮细胞发生上皮间质转化,给予1 mmol/L氟非尼酮干预24 h后,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖活力,ELISA试剂盒检测炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,Western blot检测肺纤维化程度相关蛋白TGF-β1、E-Cadherin、α-SMA的表达水平以及mTOR信号通路相关蛋白mTOR和S6K1的磷酸化水平.结果 与对照组相比,PQ组大鼠肺组织炎症反应明显,MDA、HYP含量以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),而SOD含量以及E-Cadherin蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);与PQ组相比,PQ+ AKF-PD组大鼠肺组织炎症反应明显减轻,MDA、HYP含量以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),而SOD含量以及E-Cadherin表达水平显著升高(P＜0.01);与对照组相比,PQ组细胞增殖活力显著下降(P＜0.05),炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著升高(P＜0.01),TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平以及mTOR和S6K1的磷酸化水平显著增加(P＜0.01),E-Cadherin的蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);与PQ组相比,PQ+ AKF-PD组细胞增殖活力显著升高(P＜0.05),炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著降低(P＜0.01),TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平以及mTOR和S6K1的磷酸化水平显著降低(P＜0.01),而E-Cadherin的蛋白表达水平显著增加(P＜0.05).结论 AKF-PD可能通过抑制mTOR信号通路,减轻百草枯诱导的炎症反应和肺纤维化程度.
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