【摘 要】
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目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肾小球系膜细胞蛋白激酶Cα(PKC-α)活性的影响,揭示TNF-α引起肝肾综合征肾小球滤过率(GFR)下降的机制。方法选择大鼠系膜细胞株进行体外
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目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肾小球系膜细胞蛋白激酶Cα(PKC-α)活性的影响,揭示TNF-α引起肝肾综合征肾小球滤过率(GFR)下降的机制。方法选择大鼠系膜细胞株进行体外培养。按TNF-α处理的不同时间点(0、4、8、24h)分4组。分别应用Western blot、免疫荧光、免疫电镜及PKC-α活性定量检测方法,观察TNF-α对PKC-α表达量及活性的影响。结果 TNF-α处理组PKC-α蛋白表达与对照组比较无统计学差异(4h:0.75±0.13;8h:0.76±0.12;24h:0.78±0.10,vs 0h:0.84±0.11,P>0.05)。免疫荧光及免疫电镜发现:对照组PKC-α在胞质中呈弥漫性分布,核内无表达。TNF-α处理8、24h组PKC-α存在明显核周聚集,胞核内也可见少量PKC-α表达,以TNF-α处理8时最明显。PKC活性定量检测TNF-α处理8、24h组PKC-α活性明显增强(4h:1.11±0.96,P=0.612;8h:1.87±0.25,P=0.000;24h:1.68±0.14,P=0.000 vs 0h:1.07±0.06),以TNF-α处理8h组最明显(P=0.017 vs 24h)。结论 TNF-α对GMCs中的PKC-α蛋白表达量无影响,却能明显增加其PKC-α活性,后者可能是TNF-α引起GFR下降的重要信号。
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